细菌内毒素检查法
标准概述
规定细菌内毒素检查的凝胶法与光度测定法（浊度法、显色基质法等）及其结果判定，用于注射剂、滴眼剂等药品及药包材、原辅料的热原（细菌内毒素）风险控制，是品种正文"细菌内毒素"检查项普遍引用的法定方法。
基础信息
| 标准号 | 《中国药典》2025年版 四部 通则 1141 |
|---|---|
| 标准名称 | 细菌内毒素检查法 |
| 标准状态 | 现行（替代 《中国药典》2020年版 四部 同名通则 1141） |
| 标准类别 | 国家标准 |
| 标准体系 | 食品药品 |
| 采标情况 | 无 |
| 发布机构 | 国家药品监督管理局、国家卫生健康委员会（国家药典委员会编制） |
| 发布日期 | 2025-03-20 |
| 实施日期 | 2025-10-01 |
主要技术内容
一、核心变化（与 2020 年版通则 1141 对比）
1、与 ICH Q4B 深度协调：2025 年版在方法描述体例、鲎试剂灵敏度复核要求、部分计算参数等方面进一步与国际协调文本（ICH Q4B Annex 14）趋同，利于进出口药品检测互认；同时保留检查用水要求、限值计算人均体重标准、凝胶法干扰试验与限度试验复试要求等中国特色。
2、方法体系细化：按技术原理对凝胶法与光度法体系进一步细化，明确各类方法的操作要点与有效性判定；方法争议时仍以凝胶限度法为准，保持结果稳定性。
3、鲎试剂灵敏度复核细化：细化标准品稀释操作（如母液制备的混匀要求、逐级稀释的混匀时间）与复核试验有效性判定条件，降低假阳性/假阴性风险。
4、光度法要求更明确：对标准曲线可靠性、回收率（50%~200%）、阴性对照判定等提出更明确要求。
5、配套 9251 指导原则系统修订：新增眼科用药内毒素限值规定；完善原辅料和包材限度制定要求；增加常见干扰因素及排除措施；详细描述难溶性样品和包材前处理；引入"低内毒素回收（LER）"现象及处理原则；明确重组 C 因子法（rFC）作为补充方法。
注：具体条款以《中国药典》2025 年版四部正式文本为准。
二、对检测行业的要点提示
1、资质与能力
承接药品细菌内毒素检查的机构应在 2025-10-01 后按 2025 年版完成方法再验证与体系文件更新，CMA 资质认定附表中的方法依据版本需同步变更。
9251 属推荐性指导原则，但品种正文或注册标准引用其内容时，相应要求即具约束力，判定依据需逐品种梳理。
2、方法选用
复杂样品（蛋白类、脂质体、含聚山梨酯处方等）检测应关注 LER 现象的识别与处理（稀释、中和、过滤等前处理及方法学验证）；必要时评估 rFC 等替代/补充方法的适用性。
光度法使用时应按新版要求建立标准曲线并验证回收率，凝胶法干扰试验按细化后的操作执行。
3、设备与设施
鲎试剂灵敏度复核、标准品稀释的混匀设备与程序需按新要求文件化；细菌内毒素检查用水质量监控记录应完整。
涉及光度法的酶标仪/浊度仪性能确认与软件数据完整性管理应同步加强。
三、常见问题（FAQ）
Q1：通则 1141 与指导原则 9251 的效力有何区别？
A：1141 为通用技术要求（法定），9251 为指导原则（推荐）；但当品种正文、注册标准或监管要求引用 9251 的具体规定时，应按引用执行。
Q2：2025 年版是否引入了不使用鲎试剂的方法？
A：是。重组 C 因子法（rFC）被明确为补充方法，适用于特定情形下减少鲎试剂依赖；方法争议时仍以凝胶限度法为准。
Q3：眼科用药的内毒素限值如何确定？
A：9251 新增了眼科用药限值规定，按给药途径与接触部位（如眼内注射参照注射剂相关要求）分级设定，具体以指导原则文本为准。
Q4：在 2025-10-01 之前按 2020 年版出具的检验报告是否有效？
A：对实施日之前已完成的检验，按当时法定标准出具的报告有效；实施日之后开展的检验应符合 2025 年版要求，注册标准衔接按 2025 年第 32 号公告执行。
